Чувствительный иммуноанализ для количественного определения Pig-MAP в образцах свиной слюны

В последние годы наблюдается растущий интерес к исследованию белков острой фазы, которые играют ключевую роль в ответе организма на воспалительные процессы. Одним из таких белков является Pig-MAP (Pig Major Acute Phase Protein), который используется как маркер воспаления у свиней. В данной статье мы рассмотрим результаты исследования, направленного на разработку чувствительного анализа для количественного определения Pig-MAP в образцах свиной слюны, а также его значение для ветеринарной диагностики.

Цели и методы исследования

Основной целью нашего исследования было создание иммунофлуоресцентного анализа с временным разрешением (TR-IFMA), который позволил бы точно измерять концентрацию Pig-MAP в слюне свиней. Для этого были использованы два моноклональных антитела, специфичных к Pig-MAP. Предел обнаружения разработанного анализа составляет 4 нг/мл, что делает его достаточно чувствительным для измерения концентрации этого белка в слюне.

Прецизионность метода была оценена на образцах слюны с различной концентрацией Pig-MAP. Внутрилабораторный коэффициент вариации составил от 4% до 14%, а межлабораторный — от 8% до 20%. Это свидетельствует о высокой надежности и воспроизводимости получаемых результатов. Кроме того, анализ сохранял линейность при разбавлении, что подтверждает его пригодность для количественной оценки.

Результаты и обсуждение

Сравнительное исследование с образцами сыворотки крови показало хорошую корреляцию с иммуноферментным анализом, что подтверждает валидность использованного метода. Медиана концентрации Pig-MAP в слюне здоровых свиней составила 19 нг/мл. Однако у свиней с различными воспалительными заболеваниями концентрация этого белка была значительно выше — в 11 раз, что указывает на его потенциальную роль как маркера воспалительных процессов.

Интересно, что средняя концентрация Pig-MAP в сыворотке крови составила 0,72 мг/мл в здоровой группе и 4,61 мг/мл в группе животных с воспалением. Коэффициент корреляции Спирмена между концентрацией Pig-MAP в сыворотке и слюне составил 0,72, что указывает на значимую взаимосвязь между этими двумя образцами. Также была отмечена корреляция между Pig-MAP в слюне и другими белками острой фазы, такими как гаптоглобин (r = 0,62) и С-реактивный белок (r = 0,65).

Одним из наиболее примечательных результатов исследования стало снижение концентрации Pig-MAP в слюне свиней с тяжёлым респираторным заболеванием. Сначала уровень этого белка составил 128 нг/мл, но после одного дня антибиотикотерапии он снизился до 8 нг/мл. Это наблюдение подчеркивает возможность использования слюны как альтернативного образца для мониторинга состояния здоровья животных и оценки эффективности лечения.

Полученные результаты показывают, что Pig-MAP присутствует в слюне свиней и может служить надежным маркером воспалительных процессов. Разработанный иммунофлуоресцентный анализ с временным разрешением открывает новые горизонты для диагностики заболеваний у свиней, позволяя проводить количественное определение Pig-MAP в слюне. Это, в свою очередь, может значительно упростить процесс диагностики и мониторинга состояния животных, а также повысить эффективность ветеринарной практики.

Таким образом, слюна может стать ценным альтернативным образцом для исследования белков острой фазы, что позволит улучшить диагностику и лечение заболеваний у свиней, а также повысить общую продуктивность свиноводства.

Источник:  Research in Veterinary Science