Статьи по ветеринарии свиней на Piginfo | Способ дифференциальной диагностики возбудителей хламидийных инфекций у свиней с помощью молекулярно-генетического метода.

Печать

Способ дифференциальной диагностики возбудителей хламидийных инфекций у свиней с помощью молекулярно-генетического метода.

Авторы разработки: Коваленко А.М., Сапегин В.М., Жабина.,
Писаренко В.Ф., Левицкая И.Л.


Дифференцировать хламидиозы можно с помощью серологических реакций, иммуноферментного анализа и молекулярно-генетических методов, но невозможно только лишь с помощью культурального, серодиагностики и аллергологического методов своевременно и точно выявить инфицированных возбудителями хламидиозов животных.

Генетические исследования связаны с анализом полиморфизма длины рестрикционных фрагментов хромосомной ДНК хламидий, ДНК – гибридизации, наличию и свойствами плазмид.

Современная классификация основывается на генетическом анализе (секвенировании ДНК хламидий). Согласно современным подходам геносистематики для описания бактериальных таксонов на уровне видов, родов, классификация хамидий и хламидиоподобных микроорганизмов базируется на наличии >95% гомологии в нуклеотидной последовательности генов 16S и 23S рРНК для всех представителей рода и >90% семейства.

Разработанная нами ПЦР тест-система (Хлами-суис БелГСХА) предназначена для диагностики хламидиозов свиней с помощью молекулярно-генетического метода позволяет детектировать Chlamydiaceae и дифференцировать возбудителей хламидиозов свиней до вида (Chl. psittaci, Chl. pneumoniae, Chl. suis, Chl. pecorum). Существующие аналогичные тест-системы для ПЦР-диагностики позволяют детектировать возбудителей хламидиозов только до семейства (Хла-ком пр-ва ФГУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора) или детектировать лишь один вид (Chlamydophila psittaci Хла-псит пр-ва ФГУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора, Chlamydophila pneumoniae АмплиСенс ФГУН ЦНИИЭ Роспотреб-надзора и т.д.).

Разработанные схемы семейсвенно- и видоспецифической диагностики хламидиозов на основе собственных (оригинальных) праймеров позволила идентифицировать соответственно до семейства и вида принадлежность хламидий, сенсибилизирующих у свиней. В первом раунде амплификации получали семейсвенноспецифический продукт. Во втором раунде амплификации использовали этот продукт в качестве матрицы и получали видоспецифические продукты, которые разделяли в агарозном геле.
Разработанная нами ПЦР тест-система позволяет:
• проводить быструю детекцию возбудителей хламидиозов свиней.
• обладает высокой специфичностью (позволяет детектировать возбудителей до вида).
• имеет высокую чувствительность (позволяет обнаружить единичные молекулы или обрывки ДНК хламидий).

Сравнительная характеристика с существующими отечественными и зарубежными аналогами

Сравнительное изучение специфичности и чувствительности ПЦР тест-системы «Хлами-суис БелГСХА» в сравнении с существующими аналогами производства ФГУ ЦНИИЭ Хла-ком, Хла-псит, АмплиСенс, а также ИФА производства ЗАО Вектор-Бест ХламиБест-IgG и ИФА-Хламидия-IgG представлены в таблице 1. Пробы клинического материала отбирали со слизистых оболочек влагалища, конъюнктивы глаз от маточного свинопоголовья с клиническими признаками хламидиоза (длительные перегулы, аборты, эндометриты) в ООО «Белгранкорм» пр-во «Шебекинская свинина». Исследования проб проводили совместно с сотрудниками Белгородской межобластной ветеринарной лаборатории.

Таблица 1. Результаты специфичности и чувствительности исследуемых тест-систем для выявления свиней инфицированных возбудителями хламидиозов
<"Диагностики возбудителей хламидийных инфекций/>


Разработанная нами ПЦР тест-система «Хлами-суис БелГСХА» позволяет выявить животных инфицированных Chl. suis. По остальным показателям были получены идентичные результаты в сравнении с коммерческими ПЦР тест-системами ХЛА-КОМ (16 положительных и 4 отрицательных пробы), ХЛА-ПСИТ (3 положительных и 17 отрицательных проб) и АмплиСенс (11 положительных и 9 отрицательных проб) производства ФГУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора. Однако, ИФА тест-система ХламиБест-IgG ЗАО Вектор-Бест в сравнении с ПЦР тест-системами показала несколько ложно-отрицательных результатов (2) при детекции Chl. psittaci (1 положительная проба и 19 отрицательных) и Chl. pneumoniae (7 положительных и 13 отрицательных результатов). ИФА тест-система ИФА-Хламидия-IgG ЗАО Вектор-Бест показала одинаковые результаты с существующими ПЦР тест-системами (1 положительная и 19 отрицательных проб).

Таким образом, только разработанная нами ПЦР тест-система «Хлами-суис БелГСХА» позволяет выявить животных, инфицированных возбудителями Chl. suis.

Источник: Журнла Перспективное свиноводство: Теория и Практика - январь 2011г. 

Статьи партнеров

Гарт Браун, Генеральный управляющий канадского центра по искусственному осеменению Gene Transfer – Genesus Inc. Каждый согласится с утверждением, что хряк – это очень важ...

30.12.2019 253

Новорожденные поросята и птенцы сталкиваются с различными проблемами, от решения которых зависит их выживание: нехватка тепла, доступ к пище, бактериальные и экологические угрозы...

16.12.2019 616

Целью команды научных сотрудников Topigs Norsvin является разработка инструментов, необходимых для удвоения генетического прогресса среди наших животных на товарных фермах. На пр...

04.12.2019 182

Динеш Теккот, Доктор наук, Genesus Inc. Продолжительность продуктивной жизни свиноматки в товарном производстве является ключевым экономический фактором, поскольку она прямо ...

01.12.2019 124

Isospora suis – энтеропаразит свиней, который вызывает кокцидиоз у новорожденных поросят. Желтая пастообразная диарея является наиболее характерным клиническим признаком заболева...

06.11.2019 102

Пол Андерсон, Генеральный управляющий компании Genesus в Юго-Восточной Азии и Управляющий отделом зарубежных продаж Genesus Inc. Филиппины [ /upload/medialibrary/11b/cont...

10.10.2019 78

Саймон Грей, Генеральный директор Genesus в России, странах СНГ и Европы, Genesus Inc. В России цена убойных свиней несколько снизилась и в настоящее время установилась на у...

30.09.2019 71

Эверест Аккано, доктор наук, генетик Genesus Inc. Отбор ремонтного молодняка – животных, которые станут родителями будущих поколений свиней в программах племенной работы ну...

30.09.2019 85

Спешим поделиться замечательной новостью: наконец-то завершен проект по организации выставочного центра оборудования Comax|FTG для свиноводства. Отличительной особенностью вы...

25.09.2019 61

Нам известно, что: - Стоимость корма составляет 60-80% стоимости производства свинины - Тип кормушки имеет существенное влияние на контроль за стоимостью корм...

23.09.2019 79

Традиционно комбикорм для сельскохозяйственных животных состоит из основных компонентов: - Макроингредиенты: зерновое сырье, отруби, шрота, жмыхи, рыбная и мясокостная мука...

04.09.2019 139