Презентация продукции

Инновации и технологии при разработке вакцины «Сувакцин PCV MH»

110

Д. Нойбергер, ветврач, Р. Свалла, ветврач, Zoetis Inc.


Введение


Вакцинирование поголовья против цирковируса свиней 2-го типа (ЦВС-2) и Mycoplasma hyopneumoniae (M.hyo) широко практикуется в нашей стране, так как эти патогены могут причинить предприятию существенный финансовый ущерб. Хотя отдельные для каждого возбудителя прививки были обоснованы, в последнее время свиноводы отдают предпочтение современным комбинированным вакцинам, содержащим два антигена одновременно. Подобная иммунизация снижает трудовые затраты и стресс у животных.


Одной из таких востребованных вакцин становится «Сувакцин PCV MH» (Fostera PCV MH) компании «Зоэтис». Созданию этого уникального инновационного продукта, высокоэффективного и удобного в использовании, предшествовали глубокие научные исследования. «Сувакцин PCV MH» – первая комбинированная вакцина компании «Зоэтис», одной дозы которой достаточно для защиты свиней от ЦВБС и энзоотической (микоплазменной) пневмонии. Благодаря надлежащему балансу антиген (адъювант) «Сувакцина PCV MH» действует мягко и безопасно.


Два антигена в одном флаконе


Разработка комбинированной вакцины включает в себя гораздо больше, чем просто смешивание в одном флаконе двух существующих продуктов. Однократная внутримышечная инъекция «Сувакцин PCV MH» в дозе 2 мл поросятам в трехнедельном возрасте и старше обеспечивает профилактику виремии, лимфоидного истощения и колонизации ЦВС-2 в лимфоидной ткани, снижает распространение цирковирусной инфекции и предотвращает поражение легких от энзоотической пневмонии, вызванной Mycoplasma hyopneumoniae (M.hyo.).


Таким образом, «Сувакцин PCV MH» защитит животных так же надежно, как и при использовании двух моновалентных вакцин «Зоэтиса»: «Респишур Один» – для профилактики энзоотической пневмонии и «Сувак-цин PCV2» (Fostera PCV) – для профилактики ЦВБС. Специалистам компании пришлось немало потрудиться, чтобы по всем своим показателям комбинированный препарат не уступал моновалентным вакцинам. Чтобы добиться этого, ученые продумали и оптимизировали каждый этап разработки и производства «Сувакцина PCV MH», успешно справившись со всеми возникающими проблемами при внедрении инновационных решений. В итоге применение однодозовой вакцины «Сувакцин PCV MH», содержащей двойной антиген, во много упрощает протоколы вакцинации.


Лучшая совместимость антигенов PCV и M.hyo


Основным препятствием, которое требовалось преодолеть при разработке комбинированной вакцины, стало опасение возможной несовместимости антигенов M.hyo и ЦВС-2. В частности, наличие антител к ЦВС-2 в сыворотке крови свиней создавало технические проблемы, связанные с активностью антигенов.


Свиная сыворотка, один из важнейших компонентов ростовой среды для M.hyo, содержит широкий спектр антител со специфичностью ко многим антигенам, в том числе и к ЦВС-2. К сожалению, в составе комбинированной вакцины анти-тела против ЦВС в M.hyo-фракции могут связываться с вакцинными ЦВС-антигенами, снижая активность последних (рис.). Чтобы решить возникшую проблему, исследователям «Зоэтиса» пришлось заняться совершенствованием процесса производства M.hyo-фракции для производства «Сувакцина PCV MH».


Вакцина не содержит бактериальных клеток M.hyo


Во время роста бактериальных клеток M.hyo иммуногенные компоненты высвобождаются в культуральную среду. Это было продемонстрировано в предыдущих исследованиях, в которых защита против M.hyo достигалась при использовании бесклеточного супернатанта культуры M.hyo, а не седиментированных цельных клеток M.hyo [1].


Аналогичная стратегия применяется и в процессе производства M.hyo-компонента «Сувакцина PCV MH». Бактериальные клетки микоплазм удаляются фильтрованием, а жидкая часть культуральной среды, богатая антигенами M.hyo, используется для производства вакцины. Таким образом, M.hyo-антиген в «Сувакцине PCV MH» представляет собой супернатант, не содержащий бактериальных клеток. То есть для получения иммунного ответа у вакцинированных свиней вместо применения цельной микробной клетки используются лишь растворимые иммуногенные протеины M.hyo. Такой подход имеет важные преимущества: повышается безопасность вакцины за счет удаления ненужных компонентов и развивается более целенаправленная иммунная реакция.





Инновации для создания совместимости антигенов


Простое удаление клеток M.hyo не может сделать антигены микоплазмы и ЦВС-2 совместимыми. Ученые компании «Зоэтис» изобрели способ удаления проблемных ЦВС-антител из жидкости, содержащей M.hyo, методом хроматографии с Протеин-А, компонентом клеточной стенки бактерии золотистого стафилококка (Staphylococcus aureus), который специфически связывается с антителами. В частности, Протеин-А широко используется в медицине благодаря способности очищать иммуноглобулины IgG. Существует множество примеров применения Протеин-А в терапии с использованием моноклональных антител, в том числе при лечении рака и аутоиммунных заболеваний. Этот протеин действует как биомолекулярная губка, которая избирательно связывает и выводит антитела [2–4].


Для производства «Сувакцина PCV MH» культуральная жидкость M.hyo, не содержащая клеток, пропускается через хроматографическую колонку с Протеин-А для удаления проблемных антител ЦВС-2. Таким образом получается очищенная M.hyo-фракция, в которой существенно уменьшена концентрация ненужных антител – IgG (рис.).


Как подтверждают многочисленные исследования, не содержащие клеток M.hyo-антигены, обработанные Протеин-А, весьма эффективны [5–7]. Усовершенствованный процесс производства вакцины не только позволяет достичь совместимости двух антигенов за счет уменьшения антител к ЦВС и других IgG, но и создает улучшенный профиль безопасности препарата, из которого удаляются излишние белковые иммунобиологические агенты. Более того, после введения вакцины иммунные клетки свиньи могут быть направлены на нужные антигены M.hyo.


Выбор идеального адъюванта


Окончательной деталью головоломки для исследователей стал поиск подходящего адъюванта, чтобы одновременно оптимизировать эффективность обоих антигенов в вакцине «Сувакцин PCV MH». После многочисленных попыток специалисты остановили свой выбор на трех ниже указанных вариантах [8–10]:

  • 5%-ный амфиджен (смесь лецитина и минерального масла);
  • 5%-ный амфиджен + 5%-ный СЛЦД (сульфо-липо-циклодекстрин);
  • 10%-ный Метастим® (его еще называют SP-масло – эмульсия типа масла в воде, состоящая из сквалена, полоксамера-121 и полисорбата-80).

В итоге из трех оцениваемых адъювантов был выбран Метастим®, создающий эффективный и безопасный профиль для данной комбинированной вакцины. В течение многих десятилетий он успешно используется во всем мире в качестве вспомогательного средства как наследие от вакцин компании «Форт Додж» (многие из них теперь являются продуктами «Зоэтиса») для применения у свиней, КРС, лошадей, а также для аналогичных продуктов других компаний. Прошлый опыт постоянно демонстрирует хороший профиль безопасности адъюванта Мeтaстим®. Его положительные свойства доказаны в полевых условиях на примере «Сувакцина MH-Один» – другой известной вакцины «Зоэтиса» против M.hyo, успешно используемой в международной практике. Помимо эффективности и безопасности Мeтaстим® обладает другими полезными характеристиками, необходимыми адъюванту вакцины:

  • помогает вызвать мощный иммунный ответ на различные антигены, в том числе и на инактивированные бактерии, вирусы и модифицированные живые вирусы;
  • не отличается противовирусным действием и не вредит вирусным антигенам;
  • имеет низкую вязкость и легко используется в шприцах.

Выводы


Разработка вакцины «Сувакцин PCV MH» потребовала проведения интенсивных исследований и создания научно-обоснованной методологии, что привело к получению инновационного комбинированного продукта однократного применения в одном флаконе. Высокая квалификация ученых компании «Зоэтис», создавших безопасную и эффективную комбинированную вакцину против ЦВС-2 (M.hyo), предопределила значительное упрощение протоколов вакцинации, которые используются производителями свинины для защиты потенциальной прибыльности своих стад.


Литература

  1. Okada M., Asai T., Ono M. et al. Protective effect of vaccination with culture supernate of M.hyopneumoniae against experimental infection in pigs. J Vet Med B Infect Dis Vet Public Health, 2000. 47:527–33.
  2. Graille M., Stura E.A., Corper A.L. et al. Crystal structure of a Staphylococcus aureus Protein A domain complexed with the Fab fragment of a human IgM antibody: Structural basis for recognition of B-cell receptors and superantigen activity. Proc. Nat. Acad. Sci., 2000. 97:5399–5404.
  3. FDA approved antibody-based therapeutics . The Immunology Link. www.immunologylink.com/ FDA-APP-Abs.html (accessed Sep-tember 2013).
  4. Monoclonal antibody therapy. h t t p : / / e n . w i k i p e d i a . o r g / w i k i / Monoclonal_antibody_therapy#cite_ note-Waldmann-1 (accessed Sep-tember 2013).
  5. Data on file. Study Report №32967, Zoetis Inc.
  6. Data on file. Study Report №B822R-US-12-046, Zoetis Inc.
  7. Data on file. Study Report №B823R-US-13-136, Zoetis Inc.
  8. Data on file. Study Report №32984, Zoetis Inc.
  9. Data on file. Study Report №32985, Zoetis Inc.
  10. Data on file. Study Report №32986, Zoetis Inc.
  11. Davis E.G., Zhang Y., Tuttle J. et al. Investigation of antigen specific lymphocyte responses in healthy horses vaccinated with an inactivated West Nile virus vaccine. Vet. Immun. Immunopath., 2008. 126:293–301.

О Компании "Zoetis"

«Зоэтис» - глобальная компания, работающая в более, чем 60 странах мира. Наша цель - обеспечение здоровья животных и эффективная поддержка наших клиентов и их бизнеса.

Основываясь на своем 60-летнем опыте, мы разрабатываем, производим и поставляем качественные вакцины и фармацевтические препараты, диагностические наборы и тесты, а также оказываем всестороннюю техническую поддержку.

Мы ежедневно работаем над решением реальных проблем, с которыми сталкиваются в своей практике ветеринарные врачи
+7 (499) 922 3022
123317, Россия, Москва, Пресненская наб., дом 10, блок С, 21 этаж, БЦ "Башня на набережной"